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應用案例

論文解析 | BeaverBeads? Streptavidin用于分選CD8+T細胞,純度高達95%!

以BeaverBeads? Streptavidin為分選工具,在脾和淋巴結(jié)樣本混合的單細胞懸液中,使用陰選的方式純化分選出CD8+T細胞,細胞純度高達95%!

研究背景

    細胞毒性T淋巴細胞(CTL)通常稱為CD8+T細胞,是白細胞的亞部,為一種特異T細胞,專門分泌各種細胞因子參與免疫作用。對某些病毒、腫瘤細胞等抗原物質(zhì)具有殺傷作用,與自然殺傷細胞構(gòu)成機體抗病毒、抗腫瘤免疫的重要防線。Naive/靜息CD8+T細胞有驚人的能力,能擴增和分化為細胞毒性效應細胞,監(jiān)視體機并清除感染。CD8+T細胞的缺失會破壞抗腫瘤免疫,增加對腫瘤生長的敏感性。CD8+T細胞功能失調(diào)也可能引發(fā)過度的免疫反應,從而導致免疫介導的損傷或病理。因此研究CD8+T細胞的分化機制對癌癥、傳染病和自身免疫性疾病的T細胞治療具有重要應用價值。


論文解析

廈門大學李淵奇教授和肖能明教授團隊在Science Advances雜志上發(fā)表研究論文Mitochondrial C1qbp promotes differentiation of effector CD8+T cells via metabolic-epigenetic reprogramming研究了線粒體C1qbp在CD8+T細胞分化中的作用,結(jié)果表明線粒體C1qbp作為一個積極調(diào)節(jié)因子起著關鍵作用,線粒體C1qbp通過控制與有氧糖酵解和線粒體氧化磷酸化(OXPHOS)偶聯(lián)的代謝物,促進CD8+T細胞的表觀遺傳學和轉(zhuǎn)錄程序。此外,研究者通過實驗,提供了線粒體代謝和CD8+T細胞分化之間的機制聯(lián)系。這些研究結(jié)果說明代謝物補充物或靶向氧磷可能在癌癥、傳染病和自身免疫性疾病的T細胞治療中具有重要應用。

0研究方法

使用BeaverBeads? Streptavidin陰選純化來自WT和C1qbp-tKO P14小鼠CD8+T細胞,通過同源CD90表達將供體細胞與宿主細胞區(qū)分開。在感染前1天,通過尾靜脈注射5×105細胞(感染3天)、5×104細胞(感染5天)和3×104細胞(感染7天)到受體小鼠體內(nèi)。在第3天和第8天,通過雙側(cè)腹腔注射,分別用2×105或5×105個單位的LCMV Armstrong菌株感染小鼠進行實驗。


實驗流程示意圖(文章原圖)


0研究結(jié)果

線粒體磷酸化和有氧糖酵解磷酸化(OXPHOS)測試結(jié)果表明,C1qbp介導的OXPHOS增強對于CD8+T細胞分化的表觀遺傳調(diào)節(jié)是必不可少的。活化的CD8T細胞比活化的CD4+T細胞有更大的糖酵解和OXPHOS需求CD8+T細胞受損OXPHOS的影響更大。

代謝組學分析表明,C1qbp缺乏的P14小鼠的CD8+T細胞與WT小鼠細胞比較,急性LCMV感染后的乙酰輔酶a降低,而富馬酸鹽和2-HG升高。富馬酸鹽是否通過抑制TET介導的DNA去甲基化或KDM5介導的組蛋白去甲基化,或者任何其他機制抑制CD8+T細胞的分化,需要進一步調(diào)查。不過,口服富馬酸二甲酯(DMF)已被批準用于治療復發(fā)緩解型多發(fā)性硬化,其特征是優(yōu)先降低CD8+T細胞。因此,該研究數(shù)據(jù)為DMF的療效提供了一個補充機制。

總之,研究發(fā)現(xiàn)C1qbp在CD8+T細胞中作為正調(diào)節(jié)因子的關鍵功能分化。通過控制與OXPHOS偶聯(lián)的代謝物,證明C1qbp有助于建立CD8+T細胞的表觀遺傳和轉(zhuǎn)錄程序,在線粒體代謝和CD8+T細胞之間提供了一種分化機制聯(lián)系。此外,這些代謝物補充或靶向OXPHOS可能在癌癥、傳染病和自身免疫性疾病的T細胞治療中有重要應用。


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